一、驗證方法

　　1、化學(xué)指示劑法：使用化學(xué)指示卡，其在高壓蒸氣滅菌時，顏色會發(fā)生變化。如121℃壓力蒸氣滅菌化學(xué)指示卡，由淡黃色變?yōu)楹谏?，通過顏色變化的深淺與對照色對比，可判斷滅菌效果是否達(dá)到要求。

　　2、留點(diǎn)溫度計法：使用0—150℃的留點(diǎn)溫度計，將其放入敞口試管中，再放置在高壓滅菌器的不同位置，如蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間等位置。檢測前需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下，每次監(jiān)測后留點(diǎn)溫度計的溫差應(yīng)在1℃之間，說明滅菌器內(nèi)的溫度分布均勻。

　　3、生物指示劑法：常用嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片，將其放入密封試管中，放置在高壓滅菌器的不同位置。滅菌后，在嚴(yán)格無菌操作條件下放入滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)56-60℃培養(yǎng)24-48小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明芽胞未全部滅活；如培養(yǎng)基顏色不變?nèi)詾樽仙?，則說明芽胞已滅活。

　　4、熱電偶法：使用校準(zhǔn)的無線熱電偶進(jìn)行溫度檢測。在空載熱分布試驗中，將多個無線熱電偶放置在高壓滅菌鍋腔室內(nèi)的不同部位，按設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行一個滅菌程序的運(yùn)行，檢測實際溫度是否均大于121℃，并確認(rèn)溫度冷點(diǎn)和最高點(diǎn)位置。在滿載熱穿透試驗中，采用滿載狀態(tài)，將無線熱電偶放置在待滅菌物品中及腔室內(nèi)的不同部位，運(yùn)行滅菌程序，檢測實際溫度是否均大于121℃。

　　二、驗證步驟

　　1、安裝鑒定（IQ）：驗證高壓滅菌器的安裝是否正確。

　　2、運(yùn)行鑒定（OQ）：確保高壓滅菌器在規(guī)定的參數(shù)范圍內(nèi)運(yùn)行。

　　3、性能鑒定（PQ）：確認(rèn)高壓滅菌器在實際條件下是否能持續(xù)實現(xiàn)滅菌。包括空載熱分布和滿載熱穿透力驗證，每種驗證需重復(fù)三次，共做六次。

　　三、驗證標(biāo)準(zhǔn)

　　1、溫度范圍：一般要求滅菌器在運(yùn)行過程中，腔室內(nèi)的溫度范圍相對于實際設(shè)定點(diǎn)為-0/+3℃。

　　2、溫度均勻性：在空載熱分布試驗和滿載熱穿透試驗中，多點(diǎn)溫度巡檢儀檢測實際溫度均大于121℃且最高與最低溫度的差值≤4℃。

　　3、微生物滅活：通過生物指示劑法驗證，滅菌后的菌片在培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，培養(yǎng)基顏色不變?nèi)詾樽仙?，說明芽胞已滅活。

　　四、注意事項

　　1、驗證過程中需確保所使用的溫度計、熱電偶等設(shè)備已校準(zhǔn)合格。

　　2、在進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗時，要嚴(yán)格無菌操作，避免污染。

　　3、不同類型的高壓滅菌器和不同的滅菌物品，可能需要根據(jù)具體情況進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整和優(yōu)化驗證方法。